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제목 일반 세균 검사 - 그람염색/Gram Stain

그람염색/Gram Stain

: 각종 균을 염색하여 현미경적으로 관찰하며 감염질환의 조기진단에 이용된다.

1. 검사원리

    그람염색법은 1884년 Hans Christian Gram에 의해서 처음으로 개발된 방법으로 각종검체및 배양집락의 현미경적 검사에 이용되며 미생물에 의한 감염여부를 조기에 진단할 수 있게 해준다. 그람염색은 각 세균의 세포벽을 이루고 있는 성분과 구조에 따라 다르게 나타나는데 그람양성세균의 경우 세포벽이 두꺼운 peptidoglycan layer와 풍부한 teicoic acid로 이루어져 있어서 organic decolorizer/탈색제 로 탈색시 쉽게 탈색되지 않으며 따라서 염색액 crystal violet이 계속 세균내에 남아있어 보라색으로 염색된다.

    반면 그람음성세균은 peptodoglycan layer가 단일층으로 되어 있으며 세포벽이 지방성분이 풍부한 lipopolysaccharide/LPS 로 이루어져 있어 organic decolorizer/탈색제 에 의해 crystal violet이 쉽게 탈색되며 따라서 대조 염색액인 safranin O로 염색되어 붉은색을 나타낸다.

2. 결과보고

    그람염색은 세균의 염색성, 모양, 크기, 배열등에 따라 판독하며 그외 여러조건/배양정도 :very young or old , dead or degenerating colony 에 따라 영향을 받을 수 있으므로 결과 판독시 참조해야 한다. 또한 검체의 그람염색시는 균뿐만 아니라 각종 epithelial cell, 염증세포의 유무등도 같이 관찰하여 보고한다.

    1 균

      *그람염색성 : 그람양성/+ -- 보라색  그람음성/- -- 붉은색
      *형태 : cocci 예 Gram/+ cocci in clusters : Staphylococci
      Gram/+ cocci in chains : Streptococci
      Gram/+ cocci, lancet-shaped diplococci : Streptococcus
      pneumoniae
      Gram/- diplococci : Neisseria gonorrheae
          coccobacilli 예 Gram/- coccobacilli
          bacilli 예 Gram/+ bacilli
      Gram/- bacilli
      * 수 : 검체를 대상으로 한 경우
      few < 5 /HPF
      some 5-10/HPF
      many > 10/HPF

      cf 소변등 fluid검체인 경우 HPF당 1개 이상의 세균이 보이면 105CFU/mL이상과연관성이 있다.

    2 각종 epithelial cell 및 염증세포도 보고한다.  

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